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Curdlan 協(xié)同Alcalase 嫩化生鮮調(diào)理牛肉工藝優(yōu)化

滁州學(xué)院生物與食品工程學(xué)院 龍門 門佳麗 詹歌 杜慶飛 周頔 蔡華珍

      來(lái)源:《肉業(yè)產(chǎn)業(yè)資訊》    2017年第2期
 
內(nèi)容摘要:摘要:以新鮮牛肉為原料,分析不同濃度的Curdlan 及Alcalase對(duì)生鮮調(diào)理牛肉剪切力、蒸煮損失及感官品質(zhì)的影響,并研究該體系
  摘要:以新鮮牛肉為原料,分析不同濃度的Curdlan 及Alcalase對(duì)生鮮調(diào)理牛肉剪切力、蒸煮損失及感官品質(zhì)的影響,并研究該體系下肌漿蛋白質(zhì)及肌原纖維蛋白質(zhì)的分解情況,優(yōu)化生鮮調(diào)理牛肉嫩化加工工藝。結(jié)果表明: 體系中Curdlan對(duì)生鮮調(diào)理牛肉剪切力、蒸煮損失及感官品質(zhì)均有顯著的影響(P<0.05) ,但是對(duì)牛肉中蛋白質(zhì)無(wú)明顯的分解作用;Alcalase 對(duì)肌原纖維蛋白質(zhì)及肌漿蛋白質(zhì)有明顯的分解作用。另外,不同的Curdlan 及Alcalase 添加量對(duì)生鮮調(diào)理牛肉的剪切力、蒸煮損失均有顯著的影響( P<0.05); 并且Curdlan、Alcalase 對(duì)生鮮調(diào)理牛肉感官品質(zhì)有顯著的促進(jìn)作用; 通過(guò)響應(yīng)曲面試驗(yàn)二次回歸法優(yōu)化生鮮調(diào)理牛肉工藝,得到工藝條件為Curdlan 添加量5.43mg/g,Alcalase 添加量4.29U/g,腌制時(shí)間73.4 h,以該工藝進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)后得到產(chǎn)品剪切力為(0.960 ±0.006)kg,蒸煮損失為(19.96±0.36)%,感官評(píng)分為92.81±0.75,與理論值相比,相對(duì)誤差小于5%,該工藝準(zhǔn)確可靠,可以用于生鮮調(diào)理牛肉的嫩化加工處理。
  關(guān)鍵詞: 牛肉; 可得然膠; 堿性蛋白酶; 生鮮; 嫩化; 剪切力; 蒸煮損失
  目前中國(guó)的牛肉銷售仍以冷凍儲(chǔ)藏銷售和市場(chǎng)開(kāi)放式的熱鮮肉銷售為主。調(diào)理肉制品是以生鮮肉為主要原料,并加入添加劑、配料及香辛料等,經(jīng)簡(jiǎn)單加工后,以包裝或散裝形式貯存、運(yùn)輸、銷售,主要特點(diǎn)是可直接食用或經(jīng)簡(jiǎn)單加工、處理就可食用。研究表明,經(jīng)過(guò)諸如香辛料、Nisin、大蒜素等腌制后,可以顯著提高牛肉的保鮮期,并對(duì)牛肉顏色有顯著的保護(hù)作用。
  可得然膠(Curdlan) 又稱為凝膠多糖、卡德蘭,是由葡萄糖通過(guò)β-l,3-D-葡萄糖苷鍵形成的多糖類線性大分子,因其來(lái)源廣泛、使用方便等特性于2006年被衛(wèi)生部批準(zhǔn)為食品添加劑新品種。研究表明,可得然膠可以在pH為3.0~9.5的水溶液中形成可逆的凝膠,通過(guò)其呈膠性能可以實(shí)現(xiàn)對(duì)面粉、肉類、肉糜類的改性。堿性蛋白酶( Alcalase)是一種專一性較弱的內(nèi)切酶,其作用位點(diǎn)有多種: Ala、Leu、Val、Tyr、Phe、Trp,可用于肉類蛋白的深度酶解,并已在干腌肉制品中得到了廣泛的應(yīng)用。雖然Curdlan及Alcalase在食品領(lǐng)域中已得到廣泛的應(yīng)用,但是應(yīng)用于牛肉加工以提高牛肉品質(zhì)的研究還未見(jiàn)報(bào)道。
  本研究擬通過(guò)不同濃度的Curdlan 及Alcalase 嫩化生鮮調(diào)理牛肉,并通過(guò)其蛋白質(zhì)分解特性及質(zhì)構(gòu)特性優(yōu)化加工工藝,以期為生鮮牛肉的發(fā)展提供理論依據(jù)及技術(shù)支持。
  1 材料與方法
  1. 1 材料與試劑
  牛肉: 根據(jù)GB/T 17238—2008從安徽翰森荷金來(lái)屠宰場(chǎng)采樣,隨機(jī)選取9條常規(guī)屠宰分割的牛背最長(zhǎng)肌,冷卻排酸24h后0~4℃冷藏備用;
  食鹽、料酒、香辛料等;
  Alcalase2.4l: 酶活力>200×104U/g;蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn): 11~250 kDa;消化片(5.5g硫酸鉀和0.5g無(wú)水硫酸銅);可得然膠。
  1.2 儀器與設(shè)備
  速冷凍離心機(jī): Allegra 64R型;自動(dòng)凱氏定氮儀: KjeltecTM 2300型; 消化爐: KDN-04型;小型電泳垂直系統(tǒng): 165-8000型;
  智能恒溫水浴鍋: ZKSY-600型;電子分析天平: AUY120型;紫外—可見(jiàn)分光光度計(jì):UV-2450型。
  1.3 方法
  1. 3. 1 工藝流程
  T1: 原料肉→前處理→Alcalase 與Curdlan 及香辛料等腌制→4℃儲(chǔ)藏→成品包裝處理
  T2: 原料肉→前處理→Alcalase 及香辛料等腌制→4℃儲(chǔ)藏→成品包裝處理
  T3: 原料肉→前處理→Curdlan 及香辛料等腌制→4℃儲(chǔ)藏→成品包裝處理
  T4: 原料肉→前處理→香辛料等腌制→4 ℃儲(chǔ)藏→成品包裝處理
  前處理: 將牛肉清洗后瀝干水分,按照長(zhǎng)寬厚切成10cm×3cm×1cm的長(zhǎng)方體塊備用。
  Alcalase 腌制: 根據(jù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)分別注射質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.002% Alcalase 酶溶液,通過(guò)不同體積注射,使肉塊中酶活力單位至試驗(yàn)要求,注射完畢后按摩雞肉促進(jìn)酶液均勻擴(kuò)散。
  Curdlan 腌制: 將Curdlan 配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10% 的可逆凝膠,在50℃水浴條件下,初步攪拌3 min后停止,繼續(xù)加熱7 min。取出后冰水冷卻,置于4℃冷藏備用。
  香辛料添加質(zhì)量分?jǐn)?shù): 八角粉0.02%、花椒粉0.001%、小茴香粉0.01%、白芷0.002%、丁香0.002%、甘草0.01%。
  1.3.2  Curdlan 協(xié)同Alcalase 對(duì)調(diào)理牛肉的影響
  (1)Curdlan 協(xié)同Alcalase 對(duì)調(diào)理牛肉品質(zhì)的影響:
  Curdlan 與Alcalase 按照質(zhì)量比為4.0mg /g、3U/g,分別按照T1、T2、T3、T4組嫩化生鮮調(diào)理牛肉,并分析其在4℃儲(chǔ)藏72h后的剪切力、蒸煮損失及感官品質(zhì)。
 ?。?)Curdlan 協(xié)同Alcalase 對(duì)調(diào)理牛肉蛋白質(zhì)水解的影響: 分別將Curdlan 與Alcalase 按照表1 添加至各設(shè)計(jì)處理組中,4℃儲(chǔ)藏48h,通過(guò)SDS-PAGE 電泳分析其蛋白質(zhì)變化結(jié)果,其中未處理作為對(duì)照組。
  表1 不同處理組設(shè)計(jì)
處理組 Curdlan 添加量/(mg·g-1) Alcalase 添加量/(U·g-1)
T1 4 3
T2 0 3
T3 4 0
T4 0 0
  1.3.3  生鮮調(diào)理牛肉嫩化工藝優(yōu)化
 ?。?)腌制時(shí)間對(duì)嫩化效果的影響: 固定Alcalase 添加量為4U/g,Curdlan 添加量為5mg/g,并分析原料肉在4℃儲(chǔ)藏24,48,72,96,120h后的剪切力、蒸煮損失及感官品質(zhì)。其中,對(duì)照組為無(wú)Alcalase 及Curdlan 添加。
 ?。?) Curdlan 添加量對(duì)嫩化效果的影響: 固定Alcalase 添加量為4 U/g,分別用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0,2,4,6,8,10 mg /g的Curdlan 溶液嫩化原料肉,并分析其在4℃儲(chǔ)藏72h后的剪切力、蒸煮損失及感官品質(zhì)。
 ?。?) Alcalase 添加量對(duì)嫩化效果的影響: 固定Curdlan 添加量為5 ng /g,分別用0,1,2,3,4,5,6 U/g的Alcalase 酶解原料肉,并分析其在4℃儲(chǔ)藏72h后的剪切力、蒸煮損失及感官品質(zhì)。
  (4)響應(yīng)曲面試驗(yàn)設(shè)計(jì): 采用軟件Design Expert 8.0.6( State-Ease,Minneapolis,MN,USA) 中的Box-Behnken 模式進(jìn)行響應(yīng)曲面試驗(yàn)設(shè)計(jì),以剪切力、蒸煮損失、感官評(píng)分為指標(biāo),Curdlan 添加、Alcalase 添加及腌制時(shí)間作為主要的考察因素( 自變量) 。
  1.3.4  指標(biāo)測(cè)定
 ?。?)蛋白組分提取。(2)SDS-PAGE 電泳方法。(3)蒸煮損失測(cè)定。(4)剪切力測(cè)定。(5)感官評(píng)定方法。
  1.4  數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
  所有數(shù)據(jù)利用Microsoft Excel 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,用SAS 9.2進(jìn)行ANOVA 分析,不同平均值之間利用LSD法進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。用Design Expert 8.0.6 建立響應(yīng)曲面回歸方程,響應(yīng)曲面試驗(yàn)結(jié)果利用最小二乘法進(jìn)行二次多項(xiàng)式回歸統(tǒng)計(jì)分析。
  2 結(jié)果與分析
  2.1  Curdlan 協(xié)同Alcalase 對(duì)生鮮調(diào)理牛肉的影響
  2.1.1  對(duì)牛肉品質(zhì)的影響由圖1可知,與T4相比,添加Curdlan 處理后( T3) ,產(chǎn)品的剪切力呈上升趨勢(shì)( P<0.05) ,而經(jīng)過(guò)Alcalase 酶解后牛肉的剪切力顯著降低( P<0.05)( T2) ; 并且Curdlan 及Alcalase 協(xié)同處理后( T1) 產(chǎn)品的剪切力略微增加,但是與T2剪切力相比,差異不顯著( P>0.05)。對(duì)于蒸煮損失,經(jīng)過(guò)Alcalase 處理后,產(chǎn)品的蒸煮損失呈顯著的升高趨勢(shì)( P<0.05,而通過(guò)T3可以看出,一定的Curdlan可以降低牛肉的蒸煮損失,并且Curdlan 及Alcalase協(xié)同處理后,可以顯著降低產(chǎn)品的蒸煮損失(P<0.05) 。原因主要是經(jīng)過(guò)Alcalase 處理后,牛肉中部分肌漿蛋白及肌原纖維蛋白逐漸分解,降低了產(chǎn)品的剪切力,但是由于酶促作用改變了牛肉中原有的保水性,因此,增加了產(chǎn)品的蒸煮損失; 另外,Curdlan 在牛肉中可以形成不可逆的凝膠,一定程度增加了產(chǎn)品的剪切力,達(dá)到保水的作用。另外,通過(guò)對(duì)產(chǎn)品感官評(píng)分可以看出,經(jīng)Alcalase 及Curdlan 處理后( T1) ,產(chǎn)品的感官評(píng)分顯著高于其余3組( P<0.05) 。
 
  
圖1 不同腌制條件對(duì)生鮮調(diào)理牛肉品質(zhì)的影響
  2.1.2   對(duì)蛋白質(zhì)水解的影響  由圖2可知,與對(duì)照組相比( T4) ,Alcalase 對(duì)肌原纖維蛋白質(zhì)有明顯的分解作用,主要表現(xiàn)為試驗(yàn)組肌原纖維蛋白質(zhì)在120~200kDa 左右的蛋白條帶變暗,70kDa及40~50 kDa 處的蛋白質(zhì)條帶顏色加深( T1、T2)。并且,在T3中可以看出,Curdlan 雖然對(duì)肌肉中質(zhì)構(gòu)特性有重要作用,但是對(duì)于肌原纖維蛋白分解無(wú)明顯作用。對(duì)于肌漿蛋白質(zhì),T1、T2中大量大分子蛋白質(zhì)逐漸分解,并且小分子逐漸累積; 主要表現(xiàn)為在試驗(yàn)組中,85~200kDa的蛋白條帶逐漸變暗消失,而30~40kDa 及40~50kDa兩處的條帶顏色逐漸變深。但是在T3中并無(wú)明顯的蛋白質(zhì)分解現(xiàn)象,因此可以看出,僅添加Curdlan 對(duì)肌漿蛋白的分解無(wú)促進(jìn)作用。
  綜合Curdlan 與Alcalase 對(duì)牛肉品質(zhì)的影響結(jié)果可以看出,對(duì)牛肉蛋白質(zhì)的存在形式有顯著分解作用的主要是Alcalase,而Curdlan 主要是影響牛肉中的質(zhì)構(gòu)特性。分析原因: ① Curdlan 本身具有良好的呈膠性能,其螺旋結(jié)構(gòu)可以吸水溶脹,競(jìng)爭(zhēng)更多水分的同時(shí)影響了其余鹽離子的活動(dòng)及蛋白質(zhì)溶液中原有的非特異結(jié)合作用、離子鍵和氫鍵;② Alcalase是一種專一性較弱的內(nèi)切蛋白酶,可能對(duì)蛋白質(zhì)長(zhǎng)鏈中多個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行作用而產(chǎn)生小分子蛋白質(zhì)、肽類等。綜上可以得出,Curdlan 與Alcalase 對(duì)牛肉蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)及組成有明顯的影響,可以用于生鮮調(diào)理牛肉的嫩化。
  

圖2 生鮮調(diào)理牛肉蛋白質(zhì)組分的SDS-PAGE 電泳圖譜
  2.2  生鮮調(diào)理牛肉嫩化工藝優(yōu)化
  2.2.1  腌制時(shí)間對(duì)生鮮調(diào)理牛肉品質(zhì)的影響  由圖3可知,隨著腌制時(shí)間的延長(zhǎng),產(chǎn)品的剪切力與蒸煮損失變化趨勢(shì)相似,均呈現(xiàn)在24~72 h時(shí)逐漸降低,顯著低于對(duì)照組剪切力與蒸煮損失( P<0.05) ,并且對(duì)應(yīng)的產(chǎn)品的感官評(píng)分逐漸增加,顯著高于對(duì)照組( P <0.05);但是隨著腌制時(shí)間的繼續(xù)延長(zhǎng)(72h后) ,產(chǎn)品的剪切力與蒸煮損失逐漸增加,對(duì)應(yīng)的感官評(píng)分逐漸降低。
  2.2.2  Curdlan 添加量對(duì)生鮮調(diào)理牛肉品質(zhì)的影響  由圖4可知,隨著Curdlan 添加量的增加,產(chǎn)品的剪切力呈先降低后增加的趨勢(shì)( P<0.05) 。由此可知Curdlan 對(duì)改善生鮮牛肉的嫩度有重要的作用; 但是,隨著Curdlan 添加量的繼續(xù)增加,導(dǎo)致凝膠能力增強(qiáng),并且與水結(jié)合的能力也逐漸增加,影響了鹽離子的活動(dòng),從而導(dǎo)致產(chǎn)品剪切力逐漸增加,隨著Curdlan 添加量的增加,產(chǎn)品的蒸煮損失逐漸降低,可能是Curdlan 多糖分子能夠與水相互作用形成分子內(nèi)氫鍵,從而達(dá)到降低蒸煮損失的作用。
  

圖3 腌制時(shí)間對(duì)生鮮調(diào)理牛肉品質(zhì)的影響
  

圖4 Curdlan 添加量對(duì)生鮮調(diào)理牛肉品質(zhì)的影響
  2.2.3  Alcalase 添加量對(duì)生鮮調(diào)理牛肉品質(zhì)的影響  由圖5可知,隨著Alcalase 添加量的增加,牛肉剪切力顯著降低,并且產(chǎn)品的感官評(píng)分先增加后降低,在酶添加量為4U/g時(shí)產(chǎn)品有較高的感官品質(zhì),并且該條件下產(chǎn)品的蒸煮損失顯著低于其余水平(P< 0.05) 。因此,適當(dāng)?shù)腁lcalase 能夠達(dá)到嫩化生鮮調(diào)理牛肉的目的,但是過(guò)高的酶添加量會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)品品質(zhì)的降低。
  

圖5 Alcalase 添加量對(duì)生鮮調(diào)理牛肉品質(zhì)的影響
  2.2.4  響應(yīng)曲面試驗(yàn)結(jié)果  根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果確定試驗(yàn)因素水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表2。表3為不同腌制條件中生鮮調(diào)理牛肉品質(zhì)變化結(jié)果。利用Design-Expert 8.0.6 軟件對(duì)表3試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行二次多項(xiàng)式回歸分析,建立以剪切力( Y1) 、蒸煮損失( Y2) 、感官評(píng)分( Y3) 對(duì)3個(gè)響應(yīng)因素的二次多項(xiàng)式的回歸方程:
  Y1= 5.48-0.79X1-0.75X2-0.02X3+0.04X1X2+4.51× 10-4X1X3+2670X2X3+0.05X21+ 0.04X22+4.68×10-5 X23,   (1)
  Y2=194.68-20.14X1-28.81X2-1.42X3-0.56X1X2+0.03X1X3+0.05X2X3+1.59X21+3.28X22+ 7.53×10-3 X23        (2)
  Y3=-201.45+42.91X1+57.51X2+1.68X3-3.82X1X2-0.06X1X3-0.06X2X3-2.34X21-3.73X22-7.48×10-3X32。 (3)
  為了驗(yàn)證建立的回歸模型是否顯著,對(duì)模型進(jìn)行方差分析,結(jié)果見(jiàn)表4。表4中結(jié)果表明,3個(gè)回歸模型的顯著性( F 檢驗(yàn)) 檢驗(yàn)結(jié)果極顯著( P<0.01) 、失擬性檢驗(yàn)結(jié)果均不顯著( P>0.05) ,說(shuō)明試驗(yàn)中優(yōu)化的二次模型能夠擬合真實(shí)的試驗(yàn)結(jié)果。另外,3個(gè)二次模型決定系數(shù)( R2 ) 與模型校正決定系數(shù)( R2Adj) 均大于0.9,并且模型信噪比均大于臨界值4。綜上結(jié)果,說(shuō)明3個(gè)模型擬合效果良好,試驗(yàn)誤差小,可信度高。因此試驗(yàn)中模型可以用于生鮮調(diào)理牛肉工藝優(yōu)化。
  
表2 試驗(yàn)自變量因素編碼及水平
因素水平 X1Curdlan 添加
量/( mg·g-1)
X2Alcalase 添加
量/( U·g-1)
X3腌制時(shí)間/h
-1 4.0 3 48
0 5.5 4 72
1 7.0 5 96
  
表3 響應(yīng)曲面試驗(yàn)結(jié)果
序號(hào) X1 X2 X3 剪切力/kg 蒸煮損失/% 感官評(píng)分
1 0 1 -1 0.969 23.69 87.66
2 1 1 0 1.201 19.37 74.66
3 0 0 0 0.979 19.87 92.65
4 1 0 -1 1.179 22.63 81.56
5 0 -1 1 0.961 28.89 83.66
6 0 -1 -1 1.169 30.05 78.63
7 -1 1 0 1.036 30.66 94.68
8 0 0 0 0.957 20.05 93.06
9 0 1 1 1.017 27.58 86.79
10 0 0 0 0.961 19.46 91.16
11 -1 -1 0 1.179 32.55 80.38
12 -1 0 -1 1.151 31.89 81.66
13 1 -1 0 1.077 24.61 83.25
14 1 0 1 1.109 25.87 79.58
15 -1 0 1 1.016 31.03 87.86
  
表4 回歸模型系數(shù)顯著性檢驗(yàn)
來(lái)源 剪切力 蒸煮損失 感官評(píng)分
F值 P值 F值 P值 F值 P值
模型 33.03 <0.0001 83.79 <0.0001 23.07 0.0002
X1 9.36 0.0184 2.77.41 <0.0001 29.74 0.0010
X2 7.34 0.0302 53.66 0.0002 14.57 0.0066
X3 36.82 0.0005 6.40 0.0393 3.20 0.1166
X1X2 39.41 0.0004 5.50 0.0515 47.82 0.0002
X1X3 2.34 0.1703 8.24 0.0240 6.11 0.0428
X2X3 36.23 0.0005 12.50 0.0095 3.18 0.1179
X12 136.75 <0.0001 105.94 <0.0001 42.43 0.0003
X22 12.37 0.0098 88.81 <0.0001 21.43 0.0024
X23 6.76 0.0354 155.30 <0.0001 28.57 0.0011
失擬項(xiàng) 6.50 0.0512 6.25 0.0544 4.53 0.0892
標(biāo)準(zhǔn)差 0.021 0.710 1.660
R2 0.977 0.991 0.967
Adj-R2 0.947 0.979 0.926
  由表4可知,各二次項(xiàng)對(duì)結(jié)果均有顯著的影響;在交互項(xiàng)中可以得出,對(duì)于剪切力,Alcalase 添加量與Curdlan 添加量及腌制時(shí)間之間對(duì)產(chǎn)品剪切力均有顯著的交互作用;對(duì)于蒸煮損失,腌制時(shí)間與Alcalase 添加量及Curdlan 添加量之間有顯著的交互作用; 對(duì)于感官評(píng)分,Curdlan 添加量與腌制時(shí)間及Alcalase 添加量之間有顯著的交互作用,具體分析如下。
  2.2.5  試驗(yàn)因素交互作用分析
圖6 不同因素間對(duì)生鮮調(diào)理牛肉剪切力的交互作用影響


圖7 不同因素間對(duì)生鮮調(diào)理牛肉蒸煮損失的交互作用影響
 ?。?)不同條件對(duì)小塊牛肉剪切力的影響: 由圖6(a) 可知,在固定腌制時(shí)間為72h時(shí),隨著Alcalase 添加量的增加,影響產(chǎn)品剪切力的Curdlan 添加量的臨界值( 最適添加量) 呈上升趨勢(shì),并且該條件下產(chǎn)品的剪切力臨界值呈先降低后升高的趨勢(shì)。主要原因是隨著酶添加量的增加,部分蛋白質(zhì)逐漸分解,牛肉中蛋白質(zhì)水解指數(shù)及肌纖維小片化指數(shù)逐漸增加,從而降低了產(chǎn)品的剪切力。當(dāng)固定Curdlan 添加量時(shí),Alcalase 添加量與腌制時(shí)間對(duì)剪切力也存在交互作用,并且從圖6(b)中可以看出,在腌制時(shí)間為70~80h 時(shí),剪切力存在臨界值;在該范圍內(nèi),隨著Alcalase 添加量的增加,該臨界值逐漸降低。由此可以看出,在生鮮牛肉調(diào)理過(guò)程中,不同的因素對(duì)肌肉環(huán)境有復(fù)雜的交互作用,通過(guò)對(duì)交互作用分析對(duì)優(yōu)化調(diào)理工藝有重要的作用。
  (2)不同條件對(duì)小塊牛肉蒸煮損失的影響: 由圖7可知,在固定Curdlan 添加量為5.5mg/g時(shí),隨著腌制時(shí)間的延長(zhǎng),不同Alcalase 添加量對(duì)蒸煮損失影響的臨界值呈先降低后升高的趨勢(shì),在腌制72h左右出現(xiàn)臨界值;主要是不同Alcalase 條件下,隨著腌制時(shí)間的延長(zhǎng),對(duì)肌肉蛋白質(zhì)作用結(jié)果也不盡相同,從而影響了產(chǎn)品的保水性及小分子的溶出。另外,不同Curdlan 添加量與腌制時(shí)間對(duì)蒸煮損失的交互作用影響與其相似,也呈現(xiàn)隨腌制時(shí)間的延長(zhǎng),不同Curdlan 添加量對(duì)蒸煮損失影響的臨界值呈先降低后升高的趨勢(shì)。主要是因?yàn)樵诩∪庵蠧urdlan 形成穩(wěn)定凝膠后,對(duì)肌肉蛋白質(zhì)分子形成包埋作用,造成蛋白質(zhì)的疏水性增強(qiáng),從而影響了產(chǎn)品的蒸煮得率。
 ?。?)不同條件對(duì)小塊牛肉感官品質(zhì)的影響: 由圖8可知Curdlan 添加量是影響產(chǎn)品感官品質(zhì)的最主要的指標(biāo),在不同條件下,隨著Curdlan 添加量的增加,產(chǎn)品的感官品質(zhì)呈先增高后降低的趨勢(shì); 固定腌制時(shí)間為72h 時(shí),隨著Alcalase添加量的增加,影響產(chǎn)品感官品質(zhì)的Curdlan 添加量的臨界值呈上升趨勢(shì),該結(jié)果與剪切力分析結(jié)果中趨勢(shì)一致,該條件中產(chǎn)品感官評(píng)分的臨界值呈先增加后降低的趨勢(shì)。另外,在固定Alcalase 添加量為4U/g時(shí),由于Curdlan 在肌肉中的呈膠能力不斷改變,導(dǎo)致隨著腌制時(shí)間的延長(zhǎng),產(chǎn)品的感官品質(zhì)呈先升高后降低的趨勢(shì)。

圖8 不同因素間對(duì)生鮮調(diào)理牛肉感官評(píng)分的交互作用影響
  2.2.6  工藝優(yōu)化  本次試驗(yàn)以感官評(píng)分最大值、剪切力及蒸煮損失最小值為目標(biāo)值,利用Design-Expert 軟件自帶的結(jié)果優(yōu)化程序?qū)ιr調(diào)理牛肉工藝進(jìn)行優(yōu)化,得到優(yōu)化后的工藝條件為Curdlan 添加量5.43 mg /g,Alcalase 添加量4.29 U/g,腌制時(shí)間73.4h,該條件下的預(yù)測(cè)值為剪切力1.0 kg,蒸煮損失19.96%,感官評(píng)分92.81,以該工藝進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)后得到產(chǎn)品剪切力為( 0.960±0.006) kg,蒸煮損失為( 19.96±0.36) %,感官評(píng)分為92.81±0.75(n=3)。相對(duì)誤差小于5%,因此該工藝準(zhǔn)確可靠,可以用于生鮮調(diào)理牛肉的嫩化加工處理。
  3 結(jié)論
  本研究結(jié)果說(shuō)明,Curdlan 與Alcalase 對(duì)生鮮調(diào)理牛肉品質(zhì)有明顯的促進(jìn)作用,Alcalase 對(duì)肌原纖維蛋白質(zhì)及肌漿蛋白質(zhì)有明顯的分解作用,而Curdlan 對(duì)肌漿蛋白及肌原纖維蛋白質(zhì)均無(wú)明顯的分解作用。Curdlan 及Alcalase不同的添加量對(duì)生鮮調(diào)理牛肉的剪切力、蒸煮損失均有顯著的影響(P<0.05);并且Curdlan、Alcalase 對(duì)生鮮調(diào)理牛肉感官品質(zhì)有顯著的促進(jìn)作用。本研究?jī)?yōu)化的工藝準(zhǔn)確可靠,可以用于生鮮調(diào)理牛肉的嫩化加工處理。
 
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